蛋白纯化攻略 | GST标签蛋白纯化

在蛋白纯化实验的过程中，保证蛋白样品的纯度和质量是关键，为了促进蛋白的可溶性，会使用不同的标签，除了常用的His标签，GST标签也是纯化实验中的明星标签。

关于GST标签蛋白及纯化

GST标签是一种亲和标签，能特异的与谷胱甘肽结合，表现为酶和底物的作用原理，利用这个原理将GST做成标签表达出融合蛋白，与带谷胱甘肽的亲和介质特异性结合纯化出目的蛋白，再用特异性的酶将GST标签切除，从而得到天然蛋白。

GST融合蛋白纯化具有纯度高、纯化条件温和、蛋白活性不受影响以及促进蛋白的可溶性表达等优势。因此，在蛋白研究中，想获得高可溶性蛋白，可优先考虑GST融合表达系统。

GST标签蛋白纯化方案

无论是大肠杆菌或者其他宿主细胞中，天然表达的还是重组表达的，各种来源的GST标签蛋白，都可以用固定的谷胱甘肽亲和层析法纯化，然后用过量的还原性谷胱甘肽竞争洗脱。使用以琼脂糖凝胶为基质的 GST Chromrose 4FF 介质，可以在相对较高流速的情况下，实现对目的蛋白的纯化。此介质通过标签与配体结合，缓冲液洗脱去除杂质，然后标签蛋白在温和且非变性的条件下被洗脱，使得蛋白的抗原性能和功能得以保护。

产品测试

层析介质：GST Chromrose 4FF

样 品：带 GST 标签的某融合蛋白

实验设备：5mL Xtrap GST 4FF 预装柱、蛋白纯化仪

平衡液/洗杂液：140mM NaCl，2.7mM KCl，10mM Na2HPO4，1.8mM KH2PO4，pH 7.4

洗脱液：140mM NaCl，2.7mM KCl，10mM Na2HPO4，1.8mM KH2PO4，10mM还原型谷胱甘肽，pH 7.4 (现配现用)

说明：

•  1、3、4、5 是其他公司 GST 标签蛋白纯化填料

•  2 是科诺赛生物的 GST Chromrose?4FF 

从测试结果看， 在相同的实验条件下，科诺赛生物的 GST Chromrose 4FF 产品载量表现较为突出。

产品介绍

GST Chromrose 4FF 是以高度交联的琼脂糖凝胶为基质的亲和层析介质，操作条件温和、特性性强，可以一步纯化各种表达系统表达的谷胱甘肤-S -转移酶、谷胱甘依赖性蛋白和谷胱甘肤转移酶的重组衍生物。