层析工艺的种类和层析介质的选择

时间:2022-10-09 11:33:49 点击数:

柱层析是色谱法中应用比较广泛的一种分离提纯方法,其在工业生产中已经成为一个独立的操作单元。由于被分离物质的品种繁多、结构各异,所以在选择分离方法及分离介质时要根据具体情况进行确定,以达到最佳的经济效益。通常生物技术下游处理程序,可概括为三步:预处理,中级纯化,精制纯化。各个阶段达到的目的不同,被处理的料液也不相同。


1. 预处理阶段,料液量大且成分比较复杂,含有多种杂质,目标产物浓度有时会很低,所以此阶段主要是对目标产物进行提取、分离,达到浓缩的目的。此阶段需要选择工作容量大、抗污染、使用寿命长且价格低廉的分离方法及层析介质。

2. 中度纯化,初步分离出来的物质需要中度纯化,此阶段适合选择性强、容量大的分离方法及层析介质。

3. 精制纯化,这阶段的料液往往比较少,杂志含量也少,但是对目标产物的纯度要求很高,必须选用高选择性、高分辨率的分离方法和层析介质。


层析分离方法根据其原理和特点不同,分类也不同,在下游处理中有较大的选择范围。本着达到协同的高效、快速、经济的目的,根据各阶段的特点要采用不同的分离纯化方法。

比如在预处理阶段,样品体积大、杂志质含量高、黏度高、有颗粒存在,此时要求在最快的速度下处理大量样品,所以一般采用吸附性介质,如离子交换层析介质和疏水层析介质。

为得到最终高纯度的目标物,以去除少量的污染物、异构体或多聚体为目的,可采用高分辨率高回收率的凝胶过滤层析介质。详细的分类可以参考下表:

层析工艺的种类.jpg


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