一文读懂 His标签蛋白纯化

His标签蛋白，大家应该都很熟悉了，它是比较常见的蛋白表达方式，可以用金属螯合层析（即IMAC）法来进行分离纯化，它具有的优点是表达方便而且基本不影响蛋白的活性。

了解一下IMAC

金属螯合层析（即IMAC）是一种新型的应用于原核蛋白纯化的技术，此方法是通过蛋白质表面一些特殊的氨基酸，与金属离子发生相互作用，从而对蛋白质进行亲和纯化。金属螯合层析法可用于多组氨酸亲和标签蛋白的快速纯化，在一个纯化步骤中可实现 100 倍的富集，甚至可以以高产率获得高达 95% 的亲和标签蛋白纯度。

His标签的过人之处

• His标签（His-Tag）由6-10个组氨酸残基组成，分子量小，不到0.84KD，通常插入在目的蛋白的C末端或N末端，不影响目标蛋白的结构和功能且能在变性条件下进行纯化，加之其价格便宜，是目前蛋白分离纯化中最受欢迎且最有效的的选择之一。

  
  

• His标签（His-Tag）可与多种金属离子发生特殊的相互作用，如Ca2+、Mg2+、Ni2+、Cu2+，Fe3+等，其原理是利用蛋白质表面的特性，使之被吸附在凝胶柱上，从而达到分离纯化蛋白的目的。

  
  

• His标签（His-Tag）蛋白纯化完之后可以不需切除此标签， 且纯化的条件温和，不会对蛋白产生功能影响。

His标签蛋白纯化填料的选择

Ni-NTA/IDA ChromroseTM 6FF是科诺赛生物研发生产的Ni亲和填料，以高流速琼脂糖为基质，以次氮基三乙酸（NTA）或亚氨基二乙酸（IDA）为配基，并螯合金属离子Ni2+而形成的一种亲和层析介质，广泛用于His标签蛋白等生物分子的分离纯化。

Ni-NTA/IDA ChromroseTM 6FF主要特点：

• 吸附容量大、选择性好、分辨率高；

• 超低限度的Ni2+泄露, 易于再生、成本低；

• 稳定性、生物/溶剂相容性优异，有利于保持产品的生物活性和提高产品收率及扩大层析操作条件的选择范围。

科诺赛生物为您提供的服务：

（1）按客户需求提供各种用于分离纯化的层析介质及层析预装柱

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