如何选择合适的肝素亲和

时间:2022-03-31 14:39:00 点击数:

选择合适的重组蛋白产品对获得正确的实验结果非常重要。可以从以下几点中进行选择:

本公司服务范围有肝素亲和以及层析填料等, 肝素亲和介质适用于与肝素分子有特异性吸附作用的蛋白分子的分离和纯化,例如:凝血因子、抗凝血酶III、生长因子、干扰素以及脂肪酶等。肝素亲和介质以琼脂糖软胶微球作为基质,采用惠诚生物特有的化学键和技术固定肝素分子,通过肝素与抗凝血酶III或具有类似结构蛋白分子之间的特异性结合力实现目标蛋白的分离

  1.蛋白来源

  一些蛋白需要一系列翻译后修饰才能成为活性成熟蛋白质。细菌不能提供这样的修饰,但哺乳动物细胞可以。因此,我们在购买时要注意蛋白质的来源。

  当然,除了上面提到的两种表达系统之外,还有酵母和昆虫的表达系统,各有优缺点,所以一定要注意选择重组蛋白。

  优势

  繁殖快,成本低,产量高;基因表达的遗传背景和调控机制明确;易于大规模栽培,成本低。

  使用方便,表达水平高,纯化方便,经过一定的翻译后处理进行糖基化修饰,操作简单,适合大规模生产;它可以诱导表达或分泌表达,产品易于纯化。

  产量高,翻译后处理与哺乳动物相似;它对一些有毒或难以表达的蛋白质有优势;无内毒素污染。

  完美的翻译后处理,活性接近天然蛋白质。

  缺点

  蛋白质通常是包涵体,很难纯化。无糖糖基化(分泌蛋白,细胞膜上不可利用的蛋白),生物活性不确定;无翻译后修饰,内毒素含量高。

  有时会出现蛋白质切割问题;糖基化不能满足要求。

  蛋白质活性不如哺乳动物;它适用于表达位于细胞中的真核蛋白质,如激酶。

  周期长,技术要求高;表达量低。

  2.物种和属的起源

  蛋白常见的物种来源有人源、小鼠源和大鼠源等。一般来说,不同种属之间的蛋白质同源性在80%以上可以视为交叉活性,可以推荐使用。

  3.生物活性和稳定性

  蛋白质的纯度、内毒素水平和批次间的稳定性将直接影响实验结果。所以优质蛋白产品会严格监控这个环节,提供详细的数据。同时,还应考虑蛋白质产品的生物活性。

  一般来说,只要记住以下五点:

  大多数人类细胞因子在小鼠细胞上是活跃的。

  许多小鼠细胞因子对人细胞也有活性,但活性低于相应的人细胞因子。

  一些人类细胞因子(如白细胞介素-7)在小鼠细胞中显示出比小鼠细胞因子更高的活性。

  干扰素、粒细胞集落刺激因子、白细胞介素-3和白细胞介素-4是物种特异性的,对非人细胞几乎没有活性。

  成纤维细胞生长因子和神经营养因子高度保守,在其他动物细胞中也能表现出良好的活性。

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